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電視動(dòng)畫(huà)《少女愛(ài)上姐姐》改編自Caramel Box于2005年發(fā)售的十八禁戀愛(ài)喜劇冒險(xiǎn)游戲《處女愛(ài)上姐姐（処女はお姉さまに戀してる）》（全年齡版稱(chēng)為《少女愛(ài)上姐姐》）。動(dòng)畫(huà)的標(biāo)題采用了全年齡的PS2版《少女愛(ài)上姐姐》。 故事的主角——鏑木財(cái)閥的獨(dú)生子，長(zhǎng)相清秀，成績(jī)出眾卻有點(diǎn)弱氣的的“好青年”宮小路瑞穗，因聽(tīng)從祖父的遺愿，被強(qiáng)迫送入一所女子學(xué)園就學(xué)，為了避免很多不必要的麻煩（或者是為了制造更多麻煩？），在青梅竹馬的真里野的強(qiáng)烈要求下，他被迫換上了女裝，在一群姐姐妹妹當(dāng)中開(kāi)始了“幸?！钡男@生活，還誤打誤撞地被選為了全校學(xué)生所憧憬的“大姐樣”。在小姐云集的女學(xué)園中引發(fā)軒然大波的瑞穗同學(xué)的未來(lái)會(huì)怎么樣呢？